jueves, 29 de septiembre de 2011

“Coproparasitoscopio directo”

Introduccion.-
Las enfermedades parasitarias contribuyen de forma importante a los problemas médicos, económicos y sociales existentes en el mundo. El diagnostico de las enfermedades parasitarias se establecen de ordinario por la demostración morfológica de los parásitos o la respuesta inmune a ellos. El diagnostico correcto requiere que:
a) El médico considere que un parásito puede ser la causa de la enfermedad
b) Se obtengan las muestras adecuadas y se transporten de modo correcto al laboratorio.
c) El laboratorio examine de modo competente los especímenes
d) Los resultados del laboratorio sean debidamente comunicados al médico.
e) Estos resultados sean interpretados de forma correcta y aplicados al cuidado del paciente.
Regularmente en el área de Parasitología, las muestras más analizadas para demostrar la presencia de parásitos intestinales del hombre son las heces fecales
Objetivo:
Conocer la importancia del diagnóstico de laboratorio de las enfermedades parasitarias. Identificar las formas parasitarias mediante la observación al microscopio.
Propósito:
Observar mediante frotis y microscopio la presencia de quistes y huevos de helmintos en nuestros frotis.


Materiales:
·         Portaobjetos
·         Cubreobjetos
·         Pipeta Pasteur
·         Vaso de precipitado
·         Microscopio
Sustancias:
·         Sol. Salina
·         Sol. De yodo
Muestra biológica:
·         Heces fecales

Procedimiento:
1.    En un porta objetos se coloco con un agitador una pequeña muestra de heces de tal forma que quedara extendida
2.    Agregar una gota de solución salina y se cubre con un cubre objetos
3.    Se repite el paso número 1 en un porta objetos limpio
4.    Al segundo frotis se le agrega yodo lugol y se cubre con un cubre objetos
5.    Se observan los dos frotis con los objetivos seco dedil (10x) y seco fuerte (40x)
6.    Se observan las diferencias de las dos muestras.
Resultados:
En el primer frotis se observo que se encontraron cristales de ácidos grasos y en el segundo frotis se encontraron fibras musculares.
Conclusión.-
En la práctica que se realizo nos dimos cuenta de que es un método es muy sencillo pero los resultados no siempre se obtienen para lo que se tendrían que hacer otros métodos para ver cual es más eficaz para encontrar parásitos que este método.
Fuentes consultadas.-

miércoles, 28 de septiembre de 2011

“Método de concentración por sedimentación Ritchie”

Introducción.-
Este método es una técnica de análisis coproparasitoscopicos considerados desconcentración fue descrita por Ritchie en 1948
Es un método que consiste en la sedimentación de parásitos intestinales en heces se logra por centrifugación ligera o por gravedad del material fecal, conduciendo a la recuperación de todos los protozoarios, huevos y larvas, especialmente huevos de tremátodos. Concentra bien estas formas y elimina bastantes detritus orgánicos. Aunque se inactivan las formas móviles de los protozoarios, se mantiene la integridad de los organismos. Es efectivo aún en heces con cantidades excesivas de grasas. Sin embrago, durante la sedimentación, aparte de concentrarse los parásitos, se quedan reunidos también algunos otros materiales, abundando los artefactos durante la observación.
 Es un método de concentración fecal muy parecido al de Faust, la única diferencia es que en esta técnica se sedimentará en el fondo la materia fecal a examinar, y es útil para encontrar huevecillos, quistes y trofozoitos muy pesados.
Es empleada cuando no se observan parásitos en el método directo ypara aumentar la probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas.
Materiales.-
·         Tubos de ensaye cónicos
·         Gasa
·         Embudo de vidrio
·         Vaso de precipitado
·         Aplicadores de madera
·         Pipeta Pasteur
·         Portaobjetos
·         Cubreobjetos

Equipo.-
·         Centrifuga
·         Microscopio

Muestra biológica.-
·         Heces fecales

Sustancias.-
·         Solución salina isotónica
·         Solución de formaldehido al 10%
·         Eter
·         Lugol

Procedimiento.-
1.    Agregar con el aplicador de madera 1gr de heces fecales en un vaso de precipitado.
2.    Se le añaden 10ml de solución salina al vaso de precipitado para poder diluir las heces fecales
3.    Se coloca la gasa en el embudo doblada en 4 partes
4.    Se filtra las heces ya diluidas en el tubo cónico
5.    Se tapa el tubo y se pone en la centrifuga a 2000rpm a 2 minutos
6.    Teniendo ya el tubo centrifugado se decanta el liquido y solo queda el sedimento
7.    Al sedimento se le agrega solución salina y se suspende
8.    Se centrifuga, se decanta y se suspende 2 veces mas
9.    Y a repetidos los pasos se decanta otra vez y se le agrega 5ml de formaldehido al 10% y se mezcla previamente dejando reposar el tubo 10min
10. Ya transcurridos los 10 minutos se le agrega 0.5ml de éter y se tapa para poder agitar el tubo durante 30 segundos
11. Se centrifuga el tubo durante 2 minutos a 2000rpm
12.  Al centrifugar sucedió que en el tubo se observaron 4 capas
 
13. De nueva cuenta se decanta
14. Con la pipeta Pasteur se extrae una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos
15.  A continuación se le agrega una gota de lugol
16. Con un cubre objetos se homogeniza y se cubre el frotis
17. Por último se observa al microscopio con los objetivos seco débil (10x) y seco fuerte (40x)

Resultados.-
Observaciones
Protozoarios encontrados
Imagen
Larva


Quistes
Fibras musculares
Grasas


Comentario.-
Al mirar los frotis en el microscopio nos dimos cuenta que existían algunas anormalidades en cuanto a parásitos.

Conclusión.-
Una vez terminada la práctica nos percatamos de que si se pueden observar algunos parásitos por medio de la realización de este método aunque es un poco tardado por el tiempo que requiere cada paso pero al final se obtuvo lo que se quería.
Fuentes consultadas.-

“Método de concentración-Flotación de Faust”

Introducción.-

El examen coproparasitoscopico (CPS) es un conjunto de técnicas diagnósticas que constituyen la indicación para la identificación de la mayoría de las enteroparasitosis causadas por protozoarios o helmintos.

La técnica de Faust, hace una buena concentración de quistes, huevos y larvas; es la técnica preferida por la generalidad de los laboratorios. Las formas parasitarias son encontradas con facilidad pues las preparaciones quedan con pocos artefactos. Los elementos parasitarios son recuperados de la capa superficial y los residuos se mantienen en el fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados son más limpios que los obtenidos por sedimentación.

Objetivo.-
 
Realizar un Coproparasitoscopio mediante la técnica de Faust para observar los parásitos que se encuentran en las heces.
Fundamento.-
En este método se utiliza  solución de Zn, cuya densidad especifica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos de Necator 1.055, Tricocefalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de helmitos, con menor peso especifico que la solución, se conserven y floten.
Técnica de Faust
Materiales.-


1.    Tubos de ensaye
2.    Portaobjetos
3.    Cubreobjetos
4.    Gasa
5.    Microscopio
6.    Asa de platino
7.    Embudo de vidrio
8.    Vaso de precipitado
9.    Abatelenguas
10. Centrifuga 
Sustancias.-
1.    Yodo lugol
2.    Solución acuosa de sulfato de Zn
3.    Agua destilada
Muestra biológica.-
·         Heces fecales



Procedimiento.-
1.    Poner en un vaso de precipitados 10ml de agua destilada y una porción de heces fecales
          
2.    Con el abatelenguas disolver las heces en el agua
3.    Una vez disueltas las heces colocar una grasa doblada en embudo de vidrio y colocar en un tubo de ensaye y filtrar la suspensión de la disolución
4.    Centrifugar el tubo a 2500 rpm durante un minuto
5.    Una vez centrifugado tirar el liquido del tubo de tal manera que quede el pero sedimento
6.    Se le agrega agua hasta la marca anterior y se centrifuga nuevamente
7.    Se repite el  mismo procedimiento 2 veces mas
              
8.    Se decanta el liquido que quedo y se le agrega sulfato de Zn al 33%, se mezcla el liquido con el sedimento y se centrifuga durante 1 minuto a 1500rpm
9.    Una vez centrifugado con el asa de platino se toman de 3 a 4 gotas de la superficie y se colocan en un portaobjetos
10. Se le agrega 1 o 2 gotas de yodo lugol
11. Se le coloca una cubreobjetos al frotis
12. Se enfoca en el microscopio para poder examinar y así dar un resultado
Resultados.-
En los frotis realizados se pudieron observar los siguientes protozoarios:
·         Fibras musculares
·         Huevecillos de tricocéfalo
·         Larvas
·         Tejido conectivo
·         Jabones


  Conclusión.-
En la práctica realizada nos pudimos dar cuenta que en el cuerpo existen sin fin de parásitos y que en las heces tenemos algunos de ellos tales como los que observamos en el microscopio y nos dimos cuenta de que este metodo es mas eficas ya que se logra encontrar lo que uno desea.

Fuentes consultadas.-